Влияние эссенциальных фосфолипидов на структурно-функциональную организацию клеточных мембран тромбоцитов у больных ишемической болезнью сердца

На правах рукописи

БЕЛОКРЫЛОВА ЛЮДМИЛА ВАЛЕНТИНОВНА

Влияние эссенциальных фосфолипидов на структурно-функциональную

организацию клеточных мембран тромбоцитов у больных ишемической

болезнью сердца

14.00.05-Внутренние болезни

14.00.06- Кардиология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук

Тюмень - 1998

Работа выполнена в Тюменской государственной медицинской академии.

Научные руководители:

доктор медицинских наук, профессор Медведева И.В.

доктор медицинских наук, профессор Шалаев С.В.

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Гапон Л.И.

кандидат медицинских наук, доцент Ковальчук Е.И.

Ведущая организация:

Институт питания РАМН

Защита диссертации состоится 10 апреля 1998г. в ____ часов на заседании диссертационного совета К 084.48.02 в Тюменской государственной медицинской академии (625023, г. Тюмень, ул. Одесская, 54).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке академии.

Автореферат разослан “10” марта 1998 года.

Ученый секретарь

диссертационного совета

доктор медицинских наук, профессор Дурыгин А.Н.

Список сокращений

 -ТФ	- -токоферол
БАД	- биологически активные добавки к пище
ГМК	- гладко мышечные клетки
ДК	- диеновые конъюгаты
ИМТ	индекс массы тела
ЛП	- липопротеиды
ЛПВП	- липопротеиды высокой плотности
ЛПНП	- липопротеиды низкой плотности
ЛПОНП	- липопротеиды очень низкой плотности
ЛФХ	- лизофосфотидилхолин
МДА	- малоновый диальдегид
МНЖК	- мононенасыщенные жирные кислоты
ОФЛ	- общие фосфолипиды
ОХС	- общий холестерин
ПНЖК	- полиненасыщенные жирные кислоты
ПОЛ	- перекисное окисление липидов
СОД	- супероксиддисмутаза
СФМ	- сфингомиелин
ТГ	- триглицериды
Тр	- тромбоциты
Тх	-тромбоксан
ФАТ	- фактор, активирующий тромбоциты
ФГ	-фибриноген
ФИ	- фосфоинозитол
ФЛ	- фосфолипиды
ФС	- фосфатидилсерин
ФХ	- фосфатидилхолин
ФЭА	- фосфатидилэтаноламин
ТБК	тиобарбитуровая кислота
ХС	- холестерин
ШО	- основания Шиффа

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы обусловлена высокой заболеваемостью, инвалидностью и смертностью от ИБС как среди пожилых лиц, так и среди лиц трудоспособного возраста (1994; Грацианский Н.А.. 1996; Константинов В.В. с соавт., 1997; Wilson, 1994; Chen, 1995). Наличие нескольких факторов риска повышает вероятность развития заболевания и его осложнений (Stamler J. et al., 1993; Kwiterovich P.O.Jr., 1995; Watts et al., 1995). Проведенные ранее исследования свидетельствуют о важном значении факторов риска ИБС, как в рамках первичной, так и вторичной профилактики ИБС (Broun et al., 1990; NCEP, 1994; Smith et al., 1995). Значимость своевременной диагностики, лечения и профилактики атеросклеротического поражения сердечно-сосудистой системы и факторов риска ИБС несомненно представляется важнейшей проблемой современной кардиологии.

Патологии тромбоцитарного звена гемостаза наряду с нарушениями липидного обмена принадлежит ведущая роль в патогенезе атеросклероза (Балуда М.В. с соавт., 1990; Грацианский Н.А., 1996; Coller, 1995). Тр участвуют и в патогенезе стабильной стенокардии напряжения (Канская Н.В. с соавт., 1990; Орлов В.Н. с соавт., 1990). В основе усиления функциональной активности Тр лежит повышение упорядоченности и ориентированности мембранных ФЛ и обогащение их ХС, в свою очередь “жесткость” мембран Тр зависит от интенсивности ПОЛ и накопления метаболитов, а также активности антиоксидантной системы (Шалаев С.В., 1993; Шатилина Л.В., 1993; Закилов А.Н., 1996).

Атеросклероз - это сложный процесс, развивающихся под действием различных факторов, многие из которых могут изменяться под действием состава диеты и ее калорийности (Погожева А.В., 1995, 1996; Watts et al., 1992; Reaven, 1996).

Промежуточной ступенью между гиполипидемической диетой и применением гиполипидемических препаратов могут стать БАД, в частности фосфолипидной природы (Тутельян В.А., 1995; Березовикова И.П., 1995; Попова Ю.П. с соавт., 1997).

Новая технология получения нативных ФЛ, применяемая при изготовлении концентрата “Витол”, позволяет сохранить практически все биологически активные компоненты. “Витол” - это концентрат нативных ФЛ растительного происхождения, представленных наиболее ценной фосфатидилхолиновой фракцией (40%) с минимальной концентрацией лизофракций (Самсонов М.А. с соавт., 1995, 1997; Бутина Е.А. с соавт., 1995).

Цель работы - изучение воздействия комплекса нативных фосфолипидов, применяемых в качестве БАД, на клинические проявления и структурно-функциональную организацию клеточных мембран тромбоцитов у больных ишемической болезнью сердца.

Задачи исследования

Исследовать основные структурные параметры клеточных мембран кровяных пластинок у больных ИБС с клиническими проявлениями стабильной стенокардии.

Оценить активность процессов ПОЛ, а также ферментативного и неферментативного звеньев антиоксидантной защиты в тромбоцитарных мембранах у больных ИБС.

Изучить воздействие факторов риска ИБС на липидную структуру и окислительный метаболизм в клеточных мембранах тромбоцитов.

Дать оценку терапевтической эффективности фосфолипидного продукта “Витол” у больных ИБС с клиническими проявлениями стабильной стенокардии II-III ФК.

Дать характеристику воздействия нативных фосфолипидов на структурно-функциональную организацию клеточных мембран тромбоцитов у больных ИБС с учетом имеющихся факторов риска.

Научная новизна В результате исследования впервые установлено, что у больных ИБС, стабильной стенокардией по сравнению со здоровыми лицами в клеточных мембранах Тр наблюдаются мембранопатологические изменения, характеризующиеся увеличением содержания ЛФХ, ОХС, коэффициента ОХС/ОФЛ. Параллельно регистрируется активация ПОЛ на фоне снижения уровня -ТФ в липидном бислое тромбоцитарных мембран.

В ходе исследования впервые доказано, что наличие таких факторов риска ИБС, как курение, ожирение, избыточное потребление животных жиров, гиперхолестеринемия, а также возраст (старше 50) лет усугубляет нарушения структурно-функциональной организации мембран тромбоцитов у больных стабильной стенокардией.

При изучении эффективности использования фосфолипидного концентрата “Витол” впервые установлено, что данная БАД, помимо снижения ОХС плазмы, обладает мембраностабилизирующими и антиоксидантными свойствами. Мембраностабилизирующее действие “Витола” проявляется в увеличении всех основных фракций фосфолипидов, снижении ОХС и соотношения ОХС/ОФЛ в мембранах Тр. Антиоксидантное действие заключается в достоверном снижении первичных (ДК) и конечных (ШО) продуктов ПОЛ и статистически значимом увеличении -ТФ в липидном бислое тромбоцитарных мембран.

Мембраностабилизирующий и антиоксидантный эффекты БАД “Витол” наиболее выражены у больных ИБС в возрасте старше 50 лет , с ожирением, избыточным потреблением животных жиров в анамнезе и исходным уровнем ОХС плазмы более 6,2 ммоль/л

Практическое значение В ходе исследования установлено, что наибольшие изменения в тромбоцитарном звене гемостаза у больных стабильной стенокардией наблюдаются при наличии таких факторов риска как курение, ожирение, избыточное потребление животных жиров и гиперхолестеринемия. Исходя из этого, данный контингент больных нуждается в проведении профилактических мероприятий, направленных на коррекцию указанных нарушений.

Нативные фосфолипиды, содержащиеся в препарате “Витол”, оказывают гиполипидемическое действие, обладают мембраномодулирущими и антиокидантными свойствами. Данная БАД наиболее эффективна у больных ИБС с ожирением, злоупотреблением животными жирами, гиперхолестеринемией, в более старшей возрастной группе,.

Полученная информация имеет важное значение в разработке новых методов лечения и профилактики атеросклероза и ИБС.

Внедрение в практику. Результаты исследования используются в работе отделения кардиологии 2 ГКБ и кафедры госпитальной терапии с курсом эндокринологии ТГМА, внедрены в практику амбулаторного лечения больных, перенесших инфаркт миокарда, в клинике НИИ КПК СО РАМН (г.Тюмень).

Основные положения, выносимые на защиту:

В клеточных мембранах тромбоцитов при стабильной стенокардии напряжения существуют изменения липидной структуры, процессов ПОЛ и состояния антиоксидантной защиты по сравнению со здоровыми лицами.

Данные изменения липидной фазы мембран тромбоцитов у больных стабильной стенокардией усугубляются при наличии факторов риска (прогрессирования) ИБС (артериальная гипертония, курение, ожирение, избыточное потребление животных жиров, возраст, уровень общего ХС плазмы).

Концентрат нативных фосфолипидов “Витол” оказывает комплексное влияние: обладает гипохолестеринемическим действием, воздействует на структурные параметры, процессы липопероксидации и антиоксидантную защиту в клеточных мембранах тромбоцитов у больных ИБС, стабильной стенокардией.

Наибольшая эффективность препарата “Витол” проявляется у больных ИБС с ожирением, избыточным потреблением жиров, гиперхолестеринемией, в старшей возрастной группе и у курящих больных.

Апробация работы состоялась 18 февраля 1998г. на совместном заседании проблемной комиссии “Медико-социальные и общебиологические проблемы здоровья населения Западно-Сибирского территориально-промышленного комплекса” и кафедры госпитальной терапии с курсом эндокринологии ТГМА. Фрагменты работы доложены на выставке “Медицина и здоровье” (Тюмень, 10-13 сентября, 1996г.), конференции , посвященной 20-летию 2ГКБ (Тюмень, декабрь, 1997), конференции по лечению сердечно-сосудистых заболеваний (Current concepts in the therapy of coronary heart disease. The second update on experimental results and clinical interventions/ Garmich-Partenkirchen, Germany. January, 28-31, 1998).

Публикации: По теме диссертации опубликовано 5 работ.

Структура и объем диссертации: Диссертация изложена на ... страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, 3 глав собственных исследований, обсуждения результатов и выводов, практических рекомендаций и списка литературы. Работа содержит ... таблиц и ... рисунков.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Объектом исследования являлись 107 больных ИБС с клиническими проявлениями стабильной стенокардии II-III ФК без тяжелых осложнений (99 мужчин, 8 женщин, средний возраст 53,96,6 г.); из них у 65 больных проводилось исследование терапевтического и метаболического эффектов фосфолипидного продукта “Витол”; 42 больных составили группу сравнения. Контрольная группа состояла из 44 практически здоровых лиц - доноров (37 мужчин и 7 женщин, средний возраст 50,21,3 г.).

Всем больным проводились общепринятые методы клинического обследования. В период проведения исследования больные не получали аспирин, а также гиполипидемические средства.

Специальные методы исследования

Выделение тромбоцитов по методу К.В. Чурина (1991г.) и приготовление липидных экстрактов из взвеси тромбоцитов.

Определение содержания фосфолипидов методом тонкослойной хроматографии (В.И. Крылов с соавт., 1978; М. Мейгс, 1975).

Определение общего холестерина по методу Златкиса-Зака.

Продукты ПОЛ: ШО определялись по методу Bidlack, Ф.З. Меерсон (1979); ДК - по методу В.В. Гаврилова (1988); ТБК-продукты (МДА) - по методу И.Д. Стальной (1977).

Показатели антиоксидантной защиты: -ТФ (Н.Н. Рудакова-Шилина, 1982); СОД (В.П. Верболович, Л.И. Подгорной, 1987); каталаза (M. Karen, Toth et al., 1986; Е. Дубинина с соавт., 1988).

Статистическая обработка данных

Материал диссертации обработан на персональном компьютере Pentium - 100 с помощью пакета статистической обработки данных “Armstat”. Статистическая обработка производилась с использованием t критерия Стьюдента для парных и непарных величин. В обработке данных также использовался корреляционный анализ. Достоверность подсчитывалась с точностью до 0,001. При этом достоверными считали различия при значении p<0,05. Все результаты выражались как Mm.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

1. Особенности липидного состава и ПОЛ в мембранах тромбоцитов у больных ИБС.

У больных стабильной стенокардией по сравнению со здоровыми лицами в клеточных мембранах Тр обнаружено достоверное (p<0,05) возрастание ЛФХ. Параллельно отмечалось статистически значимое (p<0,05) увеличение содержания ОХС, сопровождавшееся ростом соотношения ОХС/ОФЛ по отношению к его уровню у здоровых лиц (Рис 1, 2).


	Рис. 1. Содержание ОХС в мембранах тромбоцитов	Рис. 2. Соотношение ОХС/ОФЛ в мембранах тромбоцитов

Обращало на себя внимание увеличение доли ЛФХ как продукта метаболизма ФЛ, что согласуется с данными других исследователей (Стукал И.В., Горелюк И.П., 1990) и имеет место при состояниях, сопровождающихся окислительным стрессом, хотя однозначного ответа на вопрос о токсическом или повреждающем эффекте лизофракций нет до сих пор (Биленко М.В., 1989; Грибанов Г.А., 1991). Обогащение ХС мембран Тр отличается увеличением не только жесткости липидного бислоя (Шатилина Л.В. с соавт., 1989; Шалаев С.В., 1993), но и повышением числа мест связывания для эндопероксидов (Бышевский А.Ш., 1996; Gross, 1991).

Таблица 1.

Состояние процессов ПОЛ в мембранах тромбоцитов у больных ИБС (Mm).

анализируемые показатели, ед. измерения	контрольная группа (n=44)	больные ИБС(n=107)	p
ДК, нмоль/мг липидов	69,55,6	102,07,6	<0,01
ШО, I/мг липидов	24,91,9	33,22,6	<0,05
МДА, нмоль/мг липидов	6,90,9	13, 42,3	н/д
СОД, у.е. торм/мг белка	2,20,2	2,60,3	н/д
каталаза , мкмоль/мин/мг белка	1,50,1	1,30,2	н/д
-ТФ, нмоль/мл	3,80,3	2,60,2	0.002

Параллельно отмечалось достоверное увеличение уровня ДК и ШО, при этом не регистрировалось увеличения содержания МДА. Данные сдвиги не сопровождались изменением активности СОД и каталазы, однако, отмечалось достоверное уменьшение концентрации -ТФ в клеточных мембранах Тр при стабильной стенокардии (Таб. 1). При этом особое значение имеет обнаруженный дефицит -ТФ у больных стабильной стенокардией, так как ранее были получены данные о важном значении -Т в регуляции их функциональной активности Тр (Hendra, 1983; Oda., 1983; Warso, Lands, 1983; Salonen, 1989; Vatassery et al., 1989).

Изучение структурно-функциональных параметров клеточных мембран Тр проводилось с учетом факторов риска ИБС.

Показатели липидной структуры и активности ПОЛ в мембранах Тр у больных ИБС с сопутствующей артериальной гипертонией не имели достоверных различий от таковых у больных без гипертонии.

У пациентов с повышенным весом (ИМТ >25кг/м²) было установлено достоверное (p<0,05) увеличение ОХС и индекса ОХС/ОФЛ по сравнению с больными с нормальным (ИМТ<25кг/м²) весом (Рис 3).

Рис. 3. Содержание ОХС у больных c повышенным весом и больных, потреблявших избыточное количество жиров

У больных ИБС с ИМТ более 25 кг/м² по сравнению с пациентами с нормальным (ИМТ <25 кг/м²) весом (таб. 2) наблюдалось увеличение ДК (p<0,001) и МДА (p<0,002) на фоне более низкого содержания ШО (p<0,001). По-видимому, ожирение оказывает влияние на способность мембран к утилизации продуктов липопероксидации.

Таблица 2.

ПОЛ и антиоксидантная защита в мембранах тромбоцитов у больных стабильной стенокардией в зависимости от ИМТ

анализируемые показатели, ед. измерения	ИМТ 20-25 кг/м² (n=57)	ИМТ >25 кг/м²(n=50)	р
ДК, нмоль/мг липидов	64,224,5	110.18,2	<0,001
МДА, нмоль/мг липидов	9,90,9	12,11,7	<0,002
ШО, I/мг липидов	56,98	34,332,8	<0,001
СОД, у.е. торм/мг белка	2,00,3	2,30,2	н/д
каталаза , мкмоль/мин/мг белка	1,20,06	1,50,3	н/д
-ТФ, нмоль/мл	2,20,2	2,20,2	н/д

У больных с избыточным потреблением животного жира содержание ОХС и соотношения ОХС/ОФЛ были достоверно (p<0,05) выше, чем у больных ИБС с оптимальным потреблением жиров (Рис.3).

Особого внимания заслуживает достоверное увеличение содержания ОХС (p<0,01), а также соотношения ОХС/ОФЛ (p<0,05) в мембранах Тр у курящих больных ИБС.

_>>

Рис. 4. Содержание ШО в мембранах Тр у курящих больных ИБС

Кроме того, у курящих больных стабильной стенокардией (Рис. 4) было установлено достоверное повышение уровня ШО (p<0,01), что согласуется с данными Harats et al. (1990) о том, что курение непосредственно может вызывать окислительный стресс.

Согласно данным корреляционного анализа, были получены определенные взаимосвязи между количеством выкуриваемых сигарет и содержанием ОХС (r_>xy>=+0,367, p<0,05), ШО (r_>xy>=+0,312, p<0,05) и -ТФ (r_>xy>=0,422, p<0,05) в мембранах Тр. Эти результаты, в какой-то мере, согласуются с данными Brezinka and Padmos (1993) о том, что риск внутрикоронарного тромбоза достоверно связан с количеством выкуриваемых сигарет.

Таблица 3.

Содержание ЛФХ фракции в клеточных мембранах тромбоцитов в зависимости от наличия факторов риска

показатели, ед. измерения	больные ИБС	P
	некурящие (n=50) 0,0150,003	курящие (n=57) 0,0260,004	<0,05
ЛФХ, мкмоль/мл	ИМТ 20-25 кг/м²(n=57) 0,0210,002	ИМТ >25 кг/м²(n=50) 0,0310,003	<0,01
	не злоупотребляли жирами (n=39) 0,013	злоупотребляли жирами (n=68) 0,0280,003	<0,02

Увеличение содержания ЛФХ (Таб. 3) как продукта метаболизма ФЛ происходит при воздействии курения, ожирения и избытка животных жиров, как и при других состояниях, сопровождающихся окислительным стрессом (Биленко М.В., 1989; Грибанов Г.А., 1991).

Особого внимания заслуживают наиболее выраженные значения корреляционной зависимости (p<0,001) с отрицательным вектором между ОХС плазмы и ОФЛ (r_>xy>=0,344) мембран Тр, ФХ (r_>xy>=0,512) , ФЭА (r_>xy>=0,343), СФМ (r_>xy>=0,523) и ФС (r_>xy>=0,72), что свидетельствует о существенной зависимости концентрации основных фракций ФЛ от уровня ХС плазмы.

Обнаружена прямая корреляционная зависимость (p<0,001) между уровнем ОХС плазмы и накоплением метаболитов ПОЛ - ШО (r_>xy>=+0,357) и МДА (r_>xy>=+0,105).

При проведении корреляционного анализа была установлена отрицательная зависимость между возрастом больных и содержанием ОФЛ (r_>xy>=0,37; p<0,01) и ФС (r_>xy>=0,251; p<0,05) в тромбоцитарных мембранах.

Таким образом, клеточные мембраны Тр у больных стабильной стенокардией характеризуются накоплением ЛФХ, ОХС, активацией ПОЛ на фоне сниженной активности неферментативного звена антиоксидантной защиты. Гиперхолестеринемия, ожирение, избыточное потребление животных жиров, артериальная гипертония и курение усугубляют нарушения в структурно-функциональной организации клеточных мембран Тр у больных ИБС, что подтверждает их роль как факторов прогрессирования ИБС и риска артериальных тромбозов.

Наличие изменений в липидной структуре и активация ПОЛ являются основанием для проведения лечебных и профилактических мероприятий, направленных на коррекцию указанных нарушений.

2. Влияние фосфолипидного продукта “Витол” на структурно-функциональные параметры клеточных мембран тромбоцитов у больных ИБС

С целью коррекции обнаруженных в ходе исследования изменений в качестве биологически активной пищевой добавки 65 пациентам со стабильной стенокардией напряжения назначался комплекс нативных ФЛ “Витол” в дозе 5г/день в течение 21 дня. У всех больных проводилось исследование клинической эффективности и изучение параметров клеточных мембран Тр.

Применение фосфолипидного продукта “Витол” сопровождалось улучшением субъективного состояния(81,3% больных), а также достоверным снижением ХС плазмы.

“Витол” оказывал воздействие на липидную структуру мембран Тр, проявлявшееся в достоверном увеличении ОФЛ и их фракций, а также снижении ОХС и соотношения ОХС/ОФЛ (Таб. 4).

У больных стабильной стенокардией использование комплекса нативных ФЛ “Витол” вызывало достоверное снижение (p<0,01) содержания первичных продуктов ПОЛ - ДК при значительном росте -ТФ (p<0,001) в мембранах тромбоцитов (Рис. 5, 6).

Таблица 4.

Влияние фосфолипидного концентрата “Витол” на структурные параметры клеточных мембран тромбоцитов у больных стабильной стенокардией (Mm).

показатели, ед. измерения	больные ИБС, (n=65)	Р
	до лечения	после лечения
ФЭА, мкмоль/мл	0,0460,004	0,0890,005	0,001
ФХ, мкмоль/мл	0,0600,005	0,0860,006	0,001
СФМ, мкмоль/мл	0,0280,005	0,0650,009	0,001
ФС, мкмоль/мл	0,0240,004	0,0550,007	0,001
ЛФХ, мкмоль/мл	0,0190,003	0,0440,007	0,002
ОФЛ, мкмоль/мл	0,170,01	0,2900,06	0,05
ОХС, мкмоль/мл	0,350,03	0,260,03	0,05
ОХС/ОФЛ, ЕД	2,00,1	0,90,06	0,001


Рис 5. Содержание ДК в мембранах Тр	Рис. 6. Содержание -ТФ в мембранах Тр

При проведении сравнительного анализа влияния антиангинального лечения ИБС и “Витола” на структурные параметры Тр было установлено достоверное увеличение всех фракций ФЛ, ОФЛ после приема комплекса нативных ФЛ, а также уменьшение содержания ОХС в мембранах Тр и снижение ОХС/ОФЛ, в отличие от антиангинальной терапии в обычном режиме. Параллельно было установлено достоверное снижение содержания первичных продуктов ПОЛ - ДК и значительный рост -ТФ в мембранах Тр.

Изучение влияния “Витол” на клеточные параметры Тр проводилось с учетом влияния факторов риска.

Применение “Витола” у больных ИБС без сопутствующей артериальной гипертонии вызывало более значительное (p<0,01) снижение уровня ОХС в мембранах Тр по сравнению с больными с гипертонией.

Рис 7. Влияние “Витола” на фосфолипидный состав мембран у курящих больных

Комплекс нативных ФЛ “Витол” у некурящих больных ИБС оказывал более выраженное воздействие на фосфолипидный состав мембран Тр. (Рис.7). Данные корреляционного анализа также показывают, что курение имеет обратную связь уровнем ОФЛ (r_>xy>=0,360; p<0,05) и прямую связь с содержанием ОХС (r_>xy>=+0,453; p<0,05).

Рис. 8. Содержание -ТФ и активность СОД у курящих больных после курса лечения “Витолом”

Заслуживают внимания изменения со стороны изучавшихся параметров антиоксидантной защиты; у курящих больных ИБС наблюдался достоверный рост СОД и -ТФ, однако увеличение -ТФ было меньшим, чем у некурящих больных (рис.8). Данные корреляционного анализа подтверждают влияние курения на содержание СОД (r_>xy>=+0,5, p<0,02) и -ТФ (r_>xy>=0,416, p<0,05) после “Витола”.

“Витол” оказывал более выраженное модулирующее действие на мембраны Тр (Рис. 9) у больных ИБС повышенным весом (ИМТ >25 кг/м²).

* - p<0,05

* - p<0,001

Рис. 9. Влияние “Витола” на липидную структуру Тр у больных с повышенным весом

У больных избыточным весом (ИМТ>25кг/м²) по сравнению с больными с нормальным весом наблюдался более выраженное (p<0,01) увеличение содержания -ТФ при его равных исходных значениях.

Фосфолипидный концентрат “Витол” оказывал более выраженное (p<0,05) влияние, проявлявшееся в более низком содержании ОХС (0,250,025 мкмоль/мл) у лиц, не ограничивавших потребление животных жиров по сравнению с больными ИБС, не злоупотреблявших жирами (0,340,028 мкмоль/мл). Показатели ПОЛ и звеньев антиоксидантной защиты при избыточном потреблении жиров существенно не отличались от таковых у больных без избыточного потребления животных жиров.

Рис. 10. Влияние “Витола” на уровень ОХС и ОФЛ в мембранах Тр у больных ИБС с нормо- и гиперхолестеринемией

Следует отметить статистически значимое увеличение содержания ОФЛ по уровню всех фракций как при нормальном (ХС плазмы<6,2 ммоль/л, или < 240мг/дл), так и при повышенном уровне ХС (>6,2 ммоль/л, или >240мг/дл) плазмы, более выраженное увеличение легкоокисляемых фракций было зарегистрировано у больных ИБС с гиперхолестеринемией. Кроме того, у обследованных с гиперхолестеринемией наблюдается статистически значимое снижение ОХС мембран Тр (Рис. 10).

После лечения нативными ФЛ обращает внимание снижение с высокой степенью достоверности уровня ДК и статистически значимое увеличение содержания основного жирорастворимого антиоксиданта -ТФ как при нормо-, так и гиперхолестеринемии.

Концентрат нативных ФЛ “Витол” оказывает значительное влияние на липидный состав как в группе больных в возрасте от 40 до 49 лет, так и более старшей возрастной группе (от 50 до 60 лет). При этом в более старшей возрастной группе после приема “Витола” содержание ФХ достоверно выше (что не способствовало изменению соотношения легкоокисляемых фракций к трудноокисляемым), а коэффициент ОХС/ОФЛ (Рис.11) достоверно ниже, чем в группе больных в возрасте от 40 до 50 лет.

Рис. 11. Влияние “Витола” на соотношение ОХС/ОФЛ в мембранах тромбоцитов в зависимости от возраста больных.

Данные корреляционного анализа (p<0,05) также подтверждают, что содержание ФХ (r_>xy>=+0,339), СФМ (r_>xy>=+0,328), ОФЛ (r_>xy>=+0,315) после приема “Витола” имеют положительную связь с возрастом.

В возрастной группе от 40 до 49 лет наблюдалось статистически достоверное снижение ДК при практически неизменном уровне вторичных и конечных продуктов ПОЛ (Рис.12). В группе больных стабильной стенокардией в возрасте от 50 до 60 лет наблюдается снижение уровня ШО с высокой степенью достоверности при отчетливо выраженной тенденции к снижению ДК и МДА в липидном бислое. Отсутствие реакции со стороны конечных продуктов липопероксидации у более молодых больных, возможно, обусловлено активацией утилизации липоперекисей до метаболически инертных соединений, что является одним из способов регуляции активности процессов ПОЛ в мембранах Тр (Жмуров В.А., 1993).


больные ИБС, возраст 40-49 лет	больные ИБС, возраст 50-60 лет

Рис. 12. Продукты ПОЛ после “Витола”

Особенностью действия комплекса нативных ФЛ является его активирующее влияние на антиоксидантную защиту в тромбоцитарных мембранах у больных ИБС. После применения препарата “Витол” во всех группах больных регистрировалось статистически значимое возрастание содержания -ТФ.

Согласно данным экспериментальных исследований ФЛ присуща синергическая антиоксидантная активность; возможна частичная регенерация -ТФ по ходу окисления при взаимодействии его феноксильных радикалов с ПНЖК фосфолипидов.(Сторожок Н.М., 1995. 1997). Отмечено, что наибольший синергический эффект свойственен ФЛ, имеющим в своем составе азотистые основания и ПНЖК (Климов А.Н., Никульчева Н.Г., 1995; Сторожок Н.М., 1995; 1997; Wassal et al., 1986, 1990; Shamovski et al., 1991, 1992).

Подводя итог сказанному выше, необходимо отметить, что при стабильной стенокардии напряжения клеточные мембраны тромбоцитов характеризуются повышенной “жесткостью” и активацией ПОЛ на фоне снижения уровня основного антиоксиданта - -ТФ.

Комплекс нативных фосфолипидов “Витол” оказывает наиболее существенное воздействие на липидную структуру мембран Тр у больных ИБС, стабильной стенокардией в сочетании с гиперхолестеринемией, ожирением, при злоупотреблении жирами, а также в более старшей возрастной группе. Использование БАД “Витол” в качестве профилактического средства позволяет корригировать нарушения структурно-функционального состояния мембран тромбоцитов при ИБС.

ВЫВОДЫ

1. У больных стабильной стенокардией по сравнению со здоровыми лицами в клеточных мембранах Тр наблюдаются мембранопатологические изменения, характеризующиеся возрастанием ОХС, увеличением коэффициента ОХС/ОФЛ при увеличении содержания ЛФХ. Параллельно регистрируется активация перекисного окисления липидов на фоне снижения уровня -ТФ липидном бислое тромбоцитарных мембран.

2. Наличие таких факторов риска ИБС как гиперхолестеринемия, ожирение, избыточное потребление животных жиров, курение, возраст (старше 50 лет) усугубляет имеющиеся нарушения структурно-функциональной организации клеточных мембран Тр.

3.Включение в комплексную терапию больных ИБС концентрата нативных ФЛ “Витол” в качестве БАД в дозе 5г/сутки в течение 21 дня сопровождается снижением ОХС плазмы.

4. У больных стабильной стенокардией после использования БАД на основе нативных ФЛ в мембранах тромбоцитов наблюдается достоверное увеличение всех основных фракций ФЛ, достоверное снижение ОХС, что приводит к нормализации соотношения ОХС/ОФЛ.

5. Комплекс нативных ФЛ “Витол” оказывает выраженное антиоксидантное действие, характеризующееся снижением содержания первичных (ДК) и конечных (ШО) продуктов ПОЛ в мембранах тромбоцитов, статистически значимым возрастанием -ТФ в мембранах Тр.

6. Мембраностабилизирующий и антиоксидантный эффекты нативных ФЛ наиболее выражены у больных ИБС старшей возрастной группы (>50 лет), с cопутствующим ожирением, избыточным потреблением жиров животного происхождения, а также при исходном уровне ОХС плазмы более 6,2 ммоль/л (240 мг/дл).

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Концентрат нативных фосфолипидов “Витол” может быть рекомендован для лечения больным ИБС с клиническими проявлениями стабильной стенокардии в дозе 5 г/сутки.

2. Использование в комплексной терапии стабильной стенокардии “Витола” у больных с наличием факторов риска (прогрессирования) атеросклероза (ожирение, курение, гиперхолестеринемия, возраст старше 50 лет) демонстрирует наиболее выраженное мембраностабилизирующее и антиоксидантное действие в мембранах тромбоцитов, что обусловливает эффективность биологически активной добавки именно у данного контингента больных.

3. С учетом мембраностабилизирующего и антиоксидантного действия в мембранах тромбоцитов “Витол” может быть рекомендован как средство для вторичной профилактики ИБС и прогрессирования атеросклероза.

4. Учитывая положительные эффекты фосфолипидов с полиненасыщенными жирнокислотными остатками рекомендуется расширять рацион питания больных ИБС за счет продуктов, богатых ненасыщенными жирными кислотами.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

Мембраностабилизирующий и антиоксидантный эффект фосфолипидного концентрата “Витол” у больных ИБС //Международный симпозиум “Медицина и охрана здоровья”.-Тюмень, 1996.-С.102. Соавторы: Матаев С.В., Медведева И.В., Дороднева Е.Ф.

Влияние однократной пищевой нагрузки белком на структурно-функциональные параметры клеточных мембран тромбоцитов у больных ИБС //Тезисы докладов научно-практической конференции “Актуальные проблемы медицины”, посвященной 20-летию 2ГКБ.-Тюмень, 1996.-С.11-12. Соавторы: Коган Е.З., Шевчук С.Ю., Медведева И.В.

Воздействие фосфолипидного комплекса “Витол” на структурно-функциональные параметры тромбоцитарных мембран у больных стабильной стенокардией // Материалы научно-практической конференции, посвященной 30-летию кафедры госпитальной терапии Тюменской медицинской академии. “Актуальные вопросы профилактики, лечения, диагностики наиболее распространенных заболеваний внутренних органов”. -Тюмень, 14-15 апреля 1998г.-С.10. Соавторы: Медведева И.В, Дороднева Е.Ф., Ушакова М.А.

Влияние факторов риска атеросклероза и ИБС на липидную структуру и окислительный метаболизм в клеточных мембранах тромбоцитов у больных ИБС // Материалы научно-практической конференции, посвященной 30-летию кафедры госпитальной терапии Тюменской медицинской академии. “Актуальные вопросы профилактики, лечения, диагностики наиболее распространенных заболеваний внутренних органов”. -Тюмень, 14-15 апреля 1998г.-С.10-11. Соавторы: Медведева И.В., Дороднева Е.Ф., Коган Е.З., Шевчук С.Ю., Ушакова М.А.

“Iypolipidemic remedy “ Vitol “ in coronary heart disease treatment” // Current concepts in the therapy of coronary heart disease. The second update on experimental results and clinical interventions/ Garmich-Partenkirchen, Germany. January, 28-31, 1998 I.V.Medvedeva, L.V.Belokrylova, E.F.Dorodneva.