Особо опасные инфекции

Особо опасные инфекции

Тесты для идентификации культуры.

    Морфология возбудителя.

Грам - . «Стая рыб». Подвижны. Монотрихи.

    Рост на питательных средах.

1% пептонная вода – голубая пленка.

Щелочной агар – среднии колонии голубоватого цвета.

Среда TBRS – колонии желтого цвета.

    Изучение антигенных свойств.

    Сахаролитические свойства.

Лактоза, арабиноза, дульцит –

Глюкоза, сахароза, манит, манноза, мальтоза → к

    Протеолитические свойства.

Разложение желатина, пептонизация молока +

Разложение мочевины (V. cholerae +, V. eltor - )

    Проба на оксидазу.

Оксидаза +

    Чувствительность к фагам.

Ускоренные методы

Реакция иммобилизации. На предметное стекло наносят 2 капли испражнений или материала с поверхности пептонной воды. К 1-ой капле добавляют одну каплю О-сыворотки (1:100), ко 2-ой – каплю физ раствора. Каждую каплю эмульгируют пастеровской петлей или пипеткой, накрывают покровным стеклом и просматривают под микроскопом. При положительном результате в первой капле прекращается движение вибрионов, во второй наблюдается движение.

Люминисцентно-серологический метод.

Тесты для идентификации культуры.

    Морфология возбудителя.

Грам - . Капсула. Полиморфны. Биполярность (окраска метиленовым синим).

    Рост на питательных средах.

МПА – через 48 часов «кружевной платочек».

МПБ – «сталактитовый рост»

Скошенный агар – вязкий серый налет

    Изучение антигенных свойств.

    Сахаролитические свойства.

Мальтоза, арабиноза, глюкоза (не всегда), маннит → к

Сахароза, рамноза -

    Протеолитические свойства.

Разложение желатина, свертывание молока - . H>2>S +

    Биологическая проба.

    Чувствительность к фагам.

Дифференциация возбудителей чумы

от возбудителя псевдотуберкулеза.

Признаки

Возбудитель чумы

Возбудитель псевдотуберкулеза

Подвижность

Рост на голодной среде

Чумной бактериофаг

Расщепление рамнозы

Образование мочевины

Свертывание молока

Лакмусовое молоко

Фибринолитические св-ва

Патогенность для животных

Неподвижен

Не растет

Лизируется

-

-

-

Медленное ощелачивание

Обладает

Убивает морских свинок и крыс

Подвижен

Растет

Не лизируется

+

+

+

Быстрое

ощелачивание

Не обладает

Морских свинок убивает,

крыс не убивает

Тесты для идентификации культуры.

    Морфология возбудителя.

Грам - . Не подвижны. Окраска по Романовскому – нежно-фиолетовые

    Аллергическая проба.

Пробу ставят на 3– 5день заболевания.

а) накожный метод: тулярин (1 мл – 10 млрд. убитых микробных клеток). Пробу ставят на наружной поверхности плеча. Положительная реакция – гиперемия и отечность вокруг насечки диаметром 1–2 см через 48–72 часа.

б) внутрикожный метод: взвесь убитых бактерий (1 мл – 500 млн. микробных клеток). Пробу ставят на ладонной поверхности предплечья. Положительная реакция – отечность и гипермия через 24 – 48 часов.

    Серологическая диагностика.

Линейная реакция агглютинации: 2 – 3 мл крови из локтевой вены берут в пробирку. Полученную сыворотку разводят 1:50 до 1:1600. Диагностическим титром является положительный результат реакции в разведении сыворотки от 1:100 и выше. Антигеном служит туляремийный диагностикум – убитая формалином взвесь бактерий (1 мл – 25 млрд. микробных тел).

РНГА: сыворотку разводят от 1:100 до 1:10000. Антиген – туляремийный эритроцитарный диагностикум. Диагностическим титром считают титр 1:100 и выше.

    Биологическая проба.

    Люминисцентно-микроскопический метод.

Тесты для идентификации культуры.

    Морфология возбудителя.

Грам - . Не подвижны. Капсула. В мазке располагаются беспорядочно.

    Бактериологический метод.

Производят посев крови во флаконы, в которые наливают по 30 – 50 мл агара. В каждый флакон заливают по 25 – 30 мл простерилизованного бульона. Эту среду выдерживают в термостате 2 – 3 дня, после чего добавляют по 5 мл в каждый флакон. При положительном результате на поверхности появляются колонии – мелкие, бесцветные, выпуклые с зернистостью.

    Серологическая диагностика.

Реакция Райта. Берут 1 – 2 мл крови из пальца. Получают сыворотку. Разводят 1:25 до 1:1600. Диагностическим титром является положительный результат реакции в разведении сыворотки от 1:100 и выше (при титре 1:400 – реакция резко положительная). Антигеном служит туляремийный диагностикум – убитая культура бруцелл.

    Аллергическая проба.

Внутрикожно в ладонную поверхность предплечья вводят 0,1 мл бруцеллина. Результат реакции учитывают через 24 – 48 часов. Положительная ракция характеризуется отеком и гиперемией размером 46 см.

    Биологическая проба.

    Метод иммунофлюоресценции.

Тесты для идентификации культуры.

    Морфология возбудителя.

Грам + . Не подвижны. Капсула. Спора.

    Рост на питательных средах.

МПА – «голова медузы» или «львиная грива»

МПБ – придонный рост в виде «комка ваты»

Желатин – «перевернутая елочка»

    Изучение антигенных свойств.

    Сахаролитические свойства.

Глюкоза, лактоза, мальтоза, левулеза → к

    Протеолитические свойства.

Разложение желатина, пептонизация молока +

Медленное свертывание молока. H>2>S + . NH>3> + .

    Гемолитические свойства.

Не вызывает гемолиз, в отличии от антракоида.

    Чувствительность к фагам.

    Биологическая проба.

    «Жемчужное ожерелье»:

К бульону Хоттингера прибавляют 30% инактивированной сыворотки и пенициллин из расчета 0,5 ЕД на 1 мл бульона. 3 часа в термостате. Делают мазок. Фиксируют жидкостью Карнуа (этиловый спирт, хлороформ и ледяная уксусная кислота). Окрашивают метиленовым синим и микроскопируют. Результат действия пенициллина – цепи шаров, на поминающих «жемчужное ожерелье».

10. Аллергическая проба.

Внутрикожно на внутренней поверхности предплечья вводят антраксин. Реакцию учитывают через 24 – 48 часов. Положительная реакция проявляется с первых дне заболевания.

    Реакция Асколи.

Приготовление антигена: исследуемый материал измельчают, заливают 25 – 50 кратным объемом физ раствора и кипятят. Полученный экстракт фильтруют. Для реакции используют преципитирующую сибиреязвенную сыворотку и для контроля сибиреязвенный антиген.

Постановка реакции:

1-ая пробирка – преципитирующая сыворотка + исследуемый термоэкстракт;

2-ая пробрка – преципитирующая сыворотка + стандартный сибереязвенный антиген (контроль);

3-я пробирка – преципитирующая сыворотка + термоэкстракт из шерсти здорового живтного (контроль).

При положителной реакции первых 2 пробирках образуется преципитационное кольцо, а в 3 – кольцо отсутствует.